TRASFORMAZIONE DEL COTONE CON COSTRUTTO BASATO SU SIRNA MIRA IBD

Sinopse

Il cotone è una coltura importante. Negli ultimi anni, la malattia del ricciolo fogliare del cotone (CLCuD) è diventata endemica. Ciò ha ostacolato enormemente la produzione di cotone ad alto rendimento. Questa malattia è causata da un gruppo di begomovirus denominato Cotton Leaf Curl Disease (CLCuD). Sono stati tentati diversi approcci di selezione e transgenici per superare il problema. Tra questi, l?interferenza dell?RNA (RNAi) si è dimostrata la più promettente. L?uso dell?interferenza dell?RNA è vantaggioso in quanto la tecnica è rispettosa dell?ambiente. Nell?attuale lavoro di ricerca, il costrutto genico basato sull?RNAi è stato trasformato in due varietà di cotone d?élite, MNH-786 e VH-289, per migliorare la resistenza virale contro la CLCuD. La trasformazione del costrutto nelle piante è stata effettuata con il metodo dell?apice del germoglio mediato da Agrobacterium. La trasformazione e l?integrazione riuscite del costrutto RNAi basato sull?amplicone sono state confermate tramite PCR nella generazione T1 e T2 utilizzando primer specifici per il gene. La capacità di abbattimento del costrutto C2 è stata confermata tramite PCR in tempo reale del titolo CLCuD. Il confronto tra l?indice di malattia virale e il titolo virale ha assicurato che le piante che mostravano un?integrazione positiva del gene RNAi con sintomi minimi avevano anche un titolo virale basso.